Um novo dispositivo microfluídico integrado com introdução contínua de células individuais e detecção de espécies redutoras intracelulares por detector de fluorescência induzida por laser (LIF) é relatado. Um canal central de amostragem foi desenhado sendo flanqueado por dois outros canais auxiliares. As espécies intracelulares redutoras foram derivadas por uma sonda fluorescente baseada na recém-sintetizada 2,2,6,6-tetrametil-piperidina-1-oxilo (TEMPO). As células marcadas foram hidrodinamicamente focadas pelas correntes da bainha de fluxo e sequencialmente introduzidas no canal de amostragem sob pressão hidrostática gerada por ajuste dos níveis de líquido nos reservatórios. O nível de redução intracelular em células vivas intactas L02 foi detectada por LIF sem citólise. Após estimulação com 100 mmol L-1 de peróxido de hidrogênio, durante 30 minutos, o nível de redução intracelular diminuiu em resposta ao estresse oxidativo. Foi obtida uma taxa de transferência de 41-44 células min-1.

A novel microfluidic device integrated with continuous introduction of individual cells and detection of intracellular reducing species by laser induced fluorescence (LIF) detector is reported. A single channel with one sheath-flow channel located on each side of the sampling channel was designed. The intracellular reducing species were derivatized by a newly synthesized 2,2,6,6-tetramethyl-piperidine-1-oxyl (TEMPO)-based fluorescent probe. The labeled cells were hydrodynamically focused by sheath-flow streams and sequentially introduced into the sampling channel under hydrostatic pressure generated by adjusting liquid levels in the reservoirs. Intracellular reducing level in intact living L02 cells was detected by LIF without cytolysis. Upon stimulation with 100 µmol L-1 hydrogen peroxide for 30 min, the intracellular reducing level decreased in response to oxidative stress. A throughput of 41-44 cells min-1 was obtained.

A simple and automated method for determination of ascorbic acid (AA) in complex samples by flow injection chemiluminescence (FI-CL) was presented. It is based on the inhibitory effect of ascorbic acid on the chemiluminescence reaction between luminol and hydrogen peroxide in the flow system. A home-made micro column of cation exchange resin was adapted to the FI manifold to achieve on-line removal of interference. This method was used to determine the AA content in urine samples with a detection limit of 6.03 x10(9) mol/L AA and recovery of 93.1-111.0%. This proposed method allows high - throughput determination of AA in urine samples without chromatographic separation, demonstrating that the FI-CL method has significant potential in determination of species in complex samples by adapting a micro column filled with various functionalized materials to the FI manifold.

Um método simples, sensível e seletivo para determinação simultânea de traços de ferro e alumínio por espectrofotometria catalítica foi desenvolvido. Esse método baseia-se nos efeitos catalíticos de ferro e alumínio sobre a reação de xileno cianol FF com peróxido de hidrogênio e periodato de potássio. Ferro e alumínio não apresentaram efeitos catalíticos sobre a reação de oxidação do xileno cianol FF em meio contendo apenas peróxido de hidrogênio ou apenas periodato de potássio. Entretanto, foram obtidos efeitos catalíticos significativos de ferro e alumínio quando ambos oxidantes foram usados simultaneamente. Gráficos de calibração linear foram obtidos no intervalo de 3,57 × 10-8 a 3,57 × 10-7 mol L-1 para Fe e de 1,48×10-7 a 1,48 ×10-6 mol L-1 para Al. Os limites de detecção, baseados no critério de 3 vezes o desvio padrão, foram 1,50 × 10-8 mol L-1 para Fe e 6,10 × 10-8 mol L-1 para Al. Este método foi aplicado para determinação simultânea de traços de ferro e alumínio em água de torneira, água de lago, de rio e folhas de chá sem etapas de separação e pré-concentração. Os teores de Fe e Al em águas de torneira, lago e rio foram 3,13 × 10-7, 3,21 × 10-7 e 2,74 × 10-7 mol L-1 para Fe e 1,31 × 10-6, 9,83 × 10-7 e 1,43 × 10-6 mol L-1 para Al, respectivamente. As quantidades de Fe e Al nas folhas de chá foram 3,10 × 10² µg g-1 Fe e 7,37 × 10² µg g-1 Al. Estudos complementares são necessários para o entendimento do mecanismo catalítico do ferro e alumínio nesta reação de oxidação inédita.

A simple, sensitive and selective method for the simultaneous determination of trace iron and aluminum by catalytic spectrophotometry is presented. This method is based on the catalytic effects of iron and aluminum on the reaction of xylene cyanol FF with hydrogen peroxide and potassium periodate. Both iron and aluminum did not show catalytic effects on the oxidation reaction of xylene cyanol FF in the presence of either hydrogen peroxide or potassium periodate. However, significant catalytic effects of iron and aluminum were obtained when the two oxidants were simultaneously used. Linear calibration graphs were obtained from 3.57 × 10-8 to 3.57 × 10-7 mol L-1 for Fe and from 1.48 × 10-7 to 1.48 × 10-6 mol L-1 for Al. The detection limits, based on the 3-fold standard deviation criterion, were 1.50 × 10-8 mol L-1 for Fe and 6.10 × 10-8 mol L-1 for Al. This method was applied to the simultaneous determination of trace iron and aluminum in tap water, lake water, river water and tea leaves without separation and preconcentration. Contents of Fe and Al in tap water, lake water and river water were 3.13 × 10-7, 3.21 × 10-7, 2.74 × 10-7 mol L-1 for Fe and 1.31 × 10-6, 9.83 ×10-7, 1.43× 10-6 mol L-1 for Al, respectively. Tea leaves contained 3.10 × 10² µg g-1 Fe and 7.37 × 10² µg g-1 Al. Further research is required for understanding the catalytic mechanism of iron and aluminum on this novel oxidation reaction.